மோடிக் மாற்றங்களின் விலங்கு மாதிரியை உருவாக்குவதற்காக, தன்னுடைய பல் கூழ்மக் கருவானது இடுப்புத் தண்டுவடத்தின் குருத்தெலும்புக்குக் கீழுள்ள எலும்பில் பொருத்தப்பட்டது.

Nature.com தளத்திற்கு வருகை தந்ததற்கு நன்றி. நீங்கள் பயன்படுத்தும் உலாவியில் CSS ஆதரவு குறைவாக உள்ளது. சிறந்த முடிவுகளுக்கு, புதிய உலாவியைப் பயன்படுத்துமாறு (அல்லது இன்டர்நெட் எக்ஸ்ப்ளோரரில் இணக்கப் பயன்முறையை முடக்குமாறு) பரிந்துரைக்கிறோம். இதற்கிடையில், தொடர்ச்சியான ஆதரவை உறுதிசெய்யும் வகையில், நாங்கள் இந்தத் தளத்தை ஸ்டைல்கள் மற்றும் ஜாவாஸ்கிரிப்ட் இல்லாமல் காண்பிப்போம்.
மோடிக் மாற்றத்தின் (MC) விலங்கு மாதிரிகளை நிறுவுவது, MC-ஐப் பற்றி ஆய்வு செய்வதற்கு ஒரு முக்கியமான அடிப்படையாகும். ஐம்பத்து நான்கு நியூசிலாந்து வெள்ளை முயல்கள் போலி அறுவை சிகிச்சைக் குழு, தசை உள்வைப்புக் குழு (ME குழு) மற்றும் நியூக்ளியஸ் பல்போசஸ் உள்வைப்புக் குழு (NPE குழு) எனப் பிரிக்கப்பட்டன. NPE குழுவில், முன்பக்க-பக்கவாட்டு இடுப்பு அறுவை சிகிச்சை அணுகுமுறை மூலம் முதுகெலும்பிடை வட்டு வெளிப்படுத்தப்பட்டது. மேலும், இறுதித் தட்டுக்கு அருகில் உள்ள L5 முதுகெலும்பு உடலில் ஒரு ஊசியைப் பயன்படுத்தி துளையிடப்பட்டது. L1/2 முதுகெலும்பிடை வட்டிலிருந்து ஒரு சிரிஞ்ச் மூலம் NP பிரித்தெடுக்கப்பட்டு, அதனுள் செலுத்தப்பட்டது. குருத்தெலும்புக்குக் கீழுள்ள எலும்பில் ஒரு துளையிடப்பட்டது. தசை உள்வைப்புக் குழு மற்றும் போலி அறுவை சிகிச்சைக் குழுவில் உள்ள அறுவை சிகிச்சை முறைகளும் துளையிடும் முறைகளும் NP உள்வைப்புக் குழுவில் உள்ளதைப் போலவே இருந்தன. ME குழுவில், ஒரு தசைத் துண்டு அந்தத் துளைக்குள் வைக்கப்பட்டது, அதேசமயம் போலி அறுவை சிகிச்சைக் குழுவில், துளைக்குள் எதுவும் வைக்கப்படவில்லை. அறுவை சிகிச்சைக்குப் பிறகு, MRI ஸ்கேனிங் மற்றும் மூலக்கூறு உயிரியல் சோதனைகள் செய்யப்பட்டன. NPE குழுவில் சமிக்ஞை மாறியது, ஆனால் போலி அறுவை சிகிச்சைக் குழுவிலும் ME குழுவிலும் தெளிவான சமிக்ஞை மாற்றம் எதுவும் காணப்படவில்லை. திசுவியல் ஆய்வில், உள்வைப்பு இடத்தில் அசாதாரண திசுப் பெருக்கம் காணப்பட்டதுடன், NPE குழுவில் IL-4, IL-17 மற்றும் IFN-γ ஆகியவற்றின் வெளிப்பாடு அதிகரித்திருந்தது. குருத்தெலும்புக்குக் கீழுள்ள எலும்பில் NP-ஐ உள்வைப்பதன் மூலம் MC-க்கான ஒரு விலங்கு மாதிரியை உருவாக்க முடியும்.
மோடிக் மாற்றங்கள் (MC) என்பவை காந்த அதிர்வுப் படமெடுப்பில் (MRI) தெரியும் முதுகெலும்பு முனைத் தகடுகள் மற்றும் அருகிலுள்ள எலும்பு மஜ்ஜையின் புண்கள் ஆகும். தொடர்புடைய அறிகுறிகளைக் கொண்ட நபர்களிடையே இவை மிகவும் பொதுவானவை¹. கீழ் முதுகு வலியுடன் (LBP) அதன் தொடர்பு காரணமாக, பல ஆய்வுகள் மோடிக் மாற்றங்களின் முக்கியத்துவத்தை வலியுறுத்தியுள்ளன²,³. டி ரூஸ் மற்றும் குழுவினர்⁴ மற்றும் மோடிக் குழுவினர்⁵ ஆகியோர் தனித்தனியாக முதுகெலும்பு எலும்பு மஜ்ஜையில் மூன்று வெவ்வேறு வகையான குருத்தெலும்புக்குக் கீழான சமிக்ஞை அசாதாரணங்களை முதன்முதலில் விவரித்தனர். மோடிக் வகை I மாற்றங்கள் T1-வெயிட்டட் (T1W) வரிசைகளில் ஹைப்போஇன்டென்ஸ் ஆகவும், T2-வெயிட்டட் (T2W) வரிசைகளில் ஹைப்பர்இன்டென்ஸ் ஆகவும் உள்ளன. இந்தப் புண், எலும்பு மஜ்ஜையில் உள்ள பிளவு முனைத் தகடுகள் மற்றும் அருகிலுள்ள இரத்த நாளத் துகள் திசுக்களை வெளிப்படுத்துகிறது. மோடிக் வகை II மாற்றங்கள் T1W மற்றும் T2W ஆகிய இரண்டு வரிசைகளிலும் உயர் சமிக்ஞையைக் காட்டுகின்றன. இந்த வகை புண்ணில், முனைத் தகடு அழிவு மற்றும் அருகிலுள்ள எலும்பு மஜ்ஜையின் திசுவியல் கொழுப்புப் பதிலீடு ஆகியவற்றைக் காணலாம். மோடிக் வகை III மாற்றங்கள் T1W மற்றும் T2W வரிசைகளில் குறைந்த சமிக்ஞையைக் காட்டுகின்றன. எண்ட்பிளேட்டுகளுக்கு இணையான ஸ்க்லரோடிக் புண்கள் காணப்பட்டுள்ளன6. MC என்பது முதுகெலும்பின் ஒரு நோயியல் நோயாகக் கருதப்படுகிறது மற்றும் இது முதுகெலும்பின் பல சிதைவு நோய்களுடன் நெருக்கமாக தொடர்புடையது7,8,9.
கிடைக்கப்பெற்ற தரவுகளைக் கருத்தில் கொண்டு, பல ஆய்வுகள் MC-யின் நோய்க்காரணவியல் மற்றும் நோயியல் வழிமுறைகள் குறித்த விரிவான பார்வைகளை வழங்கியுள்ளன. டிஸ்க் ஹெர்னியேஷன் காரணமாக MC ஏற்படலாம் என்று ஆல்பர்ட் மற்றும் குழுவினர் பரிந்துரைத்தனர்8. கடுமையான டிஸ்க் சிதைவு காரணமாக MC ஏற்படுகிறது என்று ஹூ மற்றும் குழுவினர் கூறினர்10. தொடர்ச்சியான டிஸ்க் அதிர்ச்சி, எண்ட்பிளேட்டில் நுண் கிழிவுகளுக்கு வழிவகுக்கும் என்று கூறும் "உள் டிஸ்க் சிதைவு" என்ற கருத்தை க்ரோக் முன்மொழிந்தார். பிளவு உருவான பிறகு, நியூக்ளியஸ் பல்போசஸ் (NP) மூலம் எண்ட்பிளேட் அழிக்கப்படுவது ஒரு தன்னுடல் தாக்குநோயைத் தூண்டக்கூடும், இது மேலும் MC-யின் வளர்ச்சிக்கு வழிவகுக்கிறது11. மா மற்றும் குழுவினர் இதேபோன்ற கருத்தைப் பகிர்ந்து கொண்டு, NP-யால் தூண்டப்பட்ட தன்னுடல் தாக்குநோய் MC-யின் நோய்ப் பிறப்பியல் உருவாக்கத்தில் முக்கியப் பங்கு வகிக்கிறது என்று தெரிவித்தனர்12.
நோயெதிர்ப்பு மண்டல செல்கள், குறிப்பாக CD4+ T ஹெல்பர் லிம்போசைட்டுகள், தன்னுடல் தாக்குநோயின் நோய்க்காரணத்தில் ஒரு முக்கியப் பங்கு வகிக்கின்றன¹³. சமீபத்தில் கண்டறியப்பட்ட Th17 துணைக்குழு, அழற்சியைத் தூண்டும் சைட்டோகைனான IL-17-ஐ உற்பத்தி செய்கிறது, கீமோகைன் வெளிப்பாட்டை ஊக்குவிக்கிறது, மற்றும் சேதமடைந்த உறுப்புகளில் உள்ள T செல்களை IFN-γ-ஐ உற்பத்தி செய்யத் தூண்டுகிறது¹⁴. Th2 செல்களும் நோயெதிர்ப்புத் துலங்கல்களின் நோய்க்காரணத்தில் ஒரு தனித்துவமான பங்கைக் கொண்டுள்ளன. ஒரு பிரதிநிதித்துவ Th2 செல்லாக IL-4-இன் வெளிப்பாடு கடுமையான நோயெதிர்ப்பு நோயியல் விளைவுகளுக்கு வழிவகுக்கும்¹⁵.
MC16,17,18,19,20,21,22,23,24 குறித்து பல மருத்துவ ஆய்வுகள் நடத்தப்பட்டிருந்தாலும், மனிதர்களில் அடிக்கடி ஏற்படும் MC செயல்முறையைப் பிரதிபலிக்கக்கூடிய மற்றும் அதன் நோய்க்காரணவியல் அல்லது இலக்கு சிகிச்சை போன்ற புதிய சிகிச்சைகளை ஆராயப் பயன்படுத்தக்கூடிய பொருத்தமான விலங்கு சோதனை மாதிரிகள் இன்னும் பற்றாக்குறையாகவே உள்ளன. இன்றுவரை, MC-யின் அடிப்படை நோயியல் வழிமுறைகளைப் பற்றி ஆய்வு செய்ய, ஒரு சில விலங்கு மாதிரிகள் மட்டுமே அறிவிக்கப்பட்டுள்ளன.
ஆல்பர்ட் மற்றும் மா முன்மொழிந்த தன்னெதிர்ப்பு கோட்பாட்டின் அடிப்படையில், இந்த ஆய்வு துளையிடப்பட்ட முதுகெலும்பு முனைத் தகட்டிற்கு அருகில் NP-ஐ தன்னுறுப்பு மாற்று அறுவை சிகிச்சை செய்வதன் மூலம் ஒரு எளிய மற்றும் மீண்டும் உருவாக்கக்கூடிய முயல் MC மாதிரியை நிறுவியது. விலங்கு மாதிரிகளின் திசுவியல் பண்புகளைக் கவனிப்பதும், MC-யின் வளர்ச்சியில் NP-யின் குறிப்பிட்ட வழிமுறைகளை மதிப்பீடு செய்வதும் மற்ற நோக்கங்களாகும். இந்த நோக்கத்திற்காக, MC-யின் முன்னேற்றத்தை ஆய்வு செய்ய மூலக்கூறு உயிரியல், MRI மற்றும் திசுவியல் ஆய்வுகள் போன்ற நுட்பங்களை நாங்கள் பயன்படுத்துகிறோம்.
அறுவை சிகிச்சையின் போது ஏற்பட்ட இரத்தப்போக்கினால் இரண்டு முயல்களும், எம்.ஆர்.ஐ பரிசோதனையின் போது மயக்க மருந்து கொடுத்ததால் நான்கு முயல்களும் இறந்தன. மீதமுள்ள 48 முயல்கள் உயிர் பிழைத்தன; அறுவை சிகிச்சைக்குப் பிறகு அவை எந்த நடத்தை அல்லது நரம்பியல் அறிகுறிகளையும் வெளிப்படுத்தவில்லை.
வெவ்வேறு துளைகளில் பதிக்கப்பட்ட திசுவின் சமிக்ஞை அடர்த்தி வேறுபடுகிறது என்பதை MRI காட்டுகிறது. NPE குழுவில் உள்ள L5 முதுகெலும்பு உடலின் சமிக்ஞை அடர்த்தி, செருகிய 12, 16 மற்றும் 20 வாரங்களுக்குப் பிறகு படிப்படியாக மாறியது (T1W வரிசை குறைந்த சமிக்ஞையையும், T2W வரிசை கலப்பு சமிக்ஞை மற்றும் குறைந்த சமிக்ஞையையும் காட்டியது) (படம் 1C), அதே சமயம், பதிக்கப்பட்ட பாகங்களின் மற்ற இரண்டு குழுக்களின் MRI தோற்றங்கள் அதே காலகட்டத்தில் ஒப்பீட்டளவில் நிலையானதாக இருந்தன (படம் 1A, B).
(A) 3 காலக்கட்டங்களில் முயலின் இடுப்பு முதுகெலும்பின் பிரதிநிதித்துவ தொடர் MRI படங்கள். போலி அறுவை சிகிச்சைக் குழுவின் படங்களில் எந்த சமிக்ஞை அசாதாரணங்களும் காணப்படவில்லை. (B) ME குழுவில் உள்ள முதுகெலும்பு உடலின் சமிக்ஞை பண்புகள் போலி அறுவை சிகிச்சைக் குழுவில் உள்ளதைப் போலவே உள்ளன, மேலும் காலப்போக்கில் உட்பொதிக்கும் இடத்தில் குறிப்பிடத்தக்க சமிக்ஞை மாற்றம் எதுவும் காணப்படவில்லை. (C) NPE குழுவில், T1W வரிசையில் குறைந்த சமிக்ஞை தெளிவாகத் தெரிகிறது, மேலும் T2W வரிசையில் கலப்பு சமிக்ஞை மற்றும் குறைந்த சமிக்ஞை தெளிவாகத் தெரிகிறது. 12-வது வாரக் காலத்திலிருந்து 20-வது வாரக் காலம் வரை, T2W வரிசையில் குறைந்த சமிக்ஞைகளைச் சுற்றியுள்ள அவ்வப்போதைய உயர் சமிக்ஞைகள் குறைகின்றன.
NPE குழுவில் முதுகெலும்பு உடலின் பொருத்தும் இடத்தில் தெளிவான எலும்பு மிகை வளர்ச்சியைக் காண முடிகிறது, மேலும் NPE குழுவுடன் ஒப்பிடும்போது 12 முதல் 20 வாரங்களில் எலும்பு மிகை வளர்ச்சி வேகமாக ஏற்படுகிறது (படம் 2C), மாதிரியாக்கப்பட்ட முதுகெலும்பு உடல்களில் குறிப்பிடத்தக்க மாற்றம் எதுவும் காணப்படவில்லை; ஷாம் குழு மற்றும் ME குழு (படம் 2C) 2A,B).
(A) பொருத்தப்பட்ட பகுதியில் உள்ள முதுகெலும்பு உடலின் மேற்பரப்பு மிகவும் மென்மையாக உள்ளது, துளை நன்றாக ஆறுகிறது, மேலும் முதுகெலும்பு உடலில் மிகை வளர்ச்சி இல்லை. (B) ME குழுவில் பொருத்தப்பட்ட இடத்தின் வடிவம் போலி அறுவை சிகிச்சைக் குழுவில் உள்ளதைப் போலவே உள்ளது, மேலும் காலப்போக்கில் பொருத்தப்பட்ட இடத்தின் தோற்றத்தில் குறிப்பிடத்தக்க மாற்றம் எதுவும் இல்லை. (C) NPE குழுவில் பொருத்தப்பட்ட இடத்தில் எலும்பு மிகை வளர்ச்சி ஏற்பட்டது. எலும்பு மிகை வளர்ச்சி வேகமாக அதிகரித்து, முதுகெலும்பிடை வட்டு வழியாக எதிர் பக்க முதுகெலும்பு உடலுக்கும் பரவியது.
திசுவியல் பகுப்பாய்வு எலும்பு உருவாக்கம் பற்றிய மேலும் விரிவான தகவல்களை வழங்குகிறது. படம் 3, H&E சாயமேற்றப்பட்ட அறுவை சிகிச்சைக்குப் பிந்தைய பிரிவுகளின் புகைப்படங்களைக் காட்டுகிறது. போலி அறுவை சிகிச்சைக் குழுவில், குருத்தெலும்பு செல்கள் நன்கு ஒழுங்கமைக்கப்பட்டிருந்தன மற்றும் செல் பெருக்கம் எதுவும் கண்டறியப்படவில்லை (படம் 3A). ME குழுவில் உள்ள நிலைமை போலி அறுவை சிகிச்சைக் குழுவில் இருந்ததைப் போலவே இருந்தது (படம் 3B). இருப்பினும், NPE குழுவில், உள்வைப்பு தளத்தில் அதிக எண்ணிக்கையிலான குருத்தெலும்பு செல்களும் NP-போன்ற செல்களின் பெருக்கமும் காணப்பட்டன (படம் 3C);
(A) இறுதித் தகட்டின் அருகே டிரபெகுலேக்களைக் காணலாம், காண்ட்ரோசைட்டுகள் சீரான செல் அளவு மற்றும் வடிவத்துடன் நேர்த்தியாக அடுக்கப்பட்டுள்ளன, மேலும் பெருக்கம் இல்லை (40 மடங்கு). (B) ME குழுவில் உள்ள உள்வைப்பு தளத்தின் நிலை, ஷாம் குழுவைப் போலவே உள்ளது. டிரபெகுலே மற்றும் காண்ட்ரோசைட்டுகளைக் காணலாம், ஆனால் உள்வைப்பு தளத்தில் தெளிவான பெருக்கம் இல்லை (40 மடங்கு). (B) காண்ட்ரோசைட்டுகள் மற்றும் NP-போன்ற செல்கள் கணிசமாகப் பெருகுவதைக் காணலாம், மேலும் காண்ட்ரோசைட்டுகளின் வடிவமும் அளவும் சீரற்றதாக உள்ளன (40 மடங்கு).
NPE மற்றும் ME ஆகிய இரண்டு குழுக்களிலும் இன்டர்லூகின் 4 (IL-4) mRNA, இன்டர்லூகின் 17 (IL-17) mRNA மற்றும் இன்டர்ஃபெரான் γ (IFN-γ) mRNA ஆகியவற்றின் வெளிப்பாடு காணப்பட்டது. இலக்கு மரபணுக்களின் வெளிப்பாட்டு நிலைகளை ஒப்பிடும்போது, ​​ME குழு மற்றும் போலி அறுவை சிகிச்சைக் குழுவுடன் ஒப்பிடுகையில், NPE குழுவில் IL-4, IL-17 மற்றும் IFN-γ ஆகியவற்றின் மரபணு வெளிப்பாடுகள் குறிப்பிடத்தக்க அளவில் அதிகரித்திருந்தன (படம் 4) (P < 0.05). போலி அறுவை சிகிச்சைக் குழுவுடன் ஒப்பிடுகையில், ME குழுவில் IL-4, IL-17 மற்றும் IFN-γ ஆகியவற்றின் வெளிப்பாட்டு நிலைகள் சிறிதளவு மட்டுமே அதிகரித்தன, மேலும் அவை புள்ளிவிவர மாற்றத்தை எட்டவில்லை (P > 0.05).
NPE குழுவில் IL-4, IL-17 மற்றும் IFN-γ ஆகியவற்றின் mRNA வெளிப்பாடானது, போலி அறுவை சிகிச்சைக் குழு மற்றும் ME குழுவை விட குறிப்பிடத்தக்க அளவு அதிகப் போக்கைக் காட்டியது (P < 0.05).
இதற்கு மாறாக, ME குழுவில் வெளிப்பாட்டு அளவுகள் குறிப்பிடத்தக்க வேறுபாட்டைக் காட்டவில்லை (P>0.05).
மாற்றப்பட்ட mRNA வெளிப்பாட்டு முறையை உறுதிப்படுத்த, IL-4 மற்றும் IL-17-க்கு எதிரான வணிகரீதியாகக் கிடைக்கும் ஆன்டிபாடிகளைப் பயன்படுத்தி வெஸ்டர்ன் பிளாட் பகுப்பாய்வு செய்யப்பட்டது. படங்கள் 5A,B-இல் காட்டப்பட்டுள்ளபடி, ME குழு மற்றும் போலி அறுவை சிகிச்சைக் குழுவுடன் ஒப்பிடும்போது, ​​NPE குழுவில் IL-4 மற்றும் IL-17-இன் புரத அளவுகள் குறிப்பிடத்தக்க அளவில் அதிகரித்திருந்தன (P < 0.05). போலி அறுவை சிகிச்சைக் குழுவுடன் ஒப்பிடும்போது, ​​ME குழுவிலும் IL-4 மற்றும் IL-17-இன் புரத அளவுகள் புள்ளிவிவரப்படி குறிப்பிடத்தக்க மாற்றங்களை எட்டவில்லை (P> 0.05).
(A) NPE குழுவில் உள்ள IL-4 மற்றும் IL-17 புரத அளவுகள், ME குழு மற்றும் மருந்துப்போலி குழுவில் உள்ளவற்றை விட குறிப்பிடத்தக்க அளவில் அதிகமாக இருந்தன (P < 0.05). (B) வெஸ்டர்ன் பிளாட் வரைபடம்.
அறுவை சிகிச்சையின் போது பெறப்படும் மனித மாதிரிகளின் எண்ணிக்கை குறைவாக இருப்பதால், MC-யின் நோய்க்காரணவியல் குறித்த தெளிவான மற்றும் விரிவான ஆய்வுகளை மேற்கொள்வது சற்றுக் கடினமாக உள்ளது. அதன் சாத்தியமான நோயியல் வழிமுறைகளைப் பற்றி ஆய்வு செய்வதற்காக, MC-யின் ஒரு விலங்கு மாதிரியை நிறுவ நாங்கள் முயன்றோம். அதே நேரத்தில், NP தன்னுறுப்பு ஒட்டுதலால் தூண்டப்பட்ட MC-யின் போக்கைக் கண்காணிக்க கதிரியக்க மதிப்பீடு, திசுவியல் மதிப்பீடு மற்றும் மூலக்கூறு உயிரியல் மதிப்பீடு ஆகியவை பயன்படுத்தப்பட்டன. இதன் விளைவாக, NP உள்வைப்பு மாதிரியானது 12-வது வாரத்திலிருந்து 20-வது வாரம் வரையிலான காலக்கட்டத்தில் சமிக்ஞை அடர்த்தியில் படிப்படியான மாற்றத்தை ஏற்படுத்தியது (T1W வரிசைகளில் கலப்பு குறைந்த சமிக்ஞை மற்றும் T2W வரிசைகளில் குறைந்த சமிக்ஞை), இது திசு மாற்றங்களைக் குறிக்கிறது. மேலும், திசுவியல் மற்றும் மூலக்கூறு உயிரியல் மதிப்பீடுகள் கதிரியக்க ஆய்வின் முடிவுகளை உறுதிப்படுத்தின.
இந்தச் சோதனையின் முடிவுகள், NPE குழுவில் உள்ள முதுகெலும்பு உடற்பகுதியில் பாதிப்பு ஏற்பட்ட இடத்தில் காட்சி மற்றும் திசுவியல் மாற்றங்கள் நிகழ்ந்தன என்பதைக் காட்டுகின்றன. அதே நேரத்தில், IL-4, IL-17 மற்றும் IFN-γ மரபணுக்களின் வெளிப்பாடும் காணப்பட்டது. இது, முதுகெலும்பு உடற்பகுதியில் தன்னுடலிலுள்ள நியூக்ளியஸ் பல்போசஸ் திசுவின் பாதிப்பானது, தொடர்ச்சியான சமிக்ஞை மற்றும் உருவவியல் மாற்றங்களை ஏற்படுத்தக்கூடும் என்பதைக் குறிக்கிறது. விலங்கு மாதிரியின் முதுகெலும்பு உடற்பகுதிகளின் சமிக்ஞைப் பண்புகள் (T1W வரிசையில் குறைந்த சமிக்ஞை, T2W வரிசையில் கலப்பு சமிக்ஞை மற்றும் குறைந்த சமிக்ஞை) மனித முதுகெலும்பு செல்களின் பண்புகளை மிகவும் ஒத்திருப்பதை எளிதாகக் கண்டறியலாம். மேலும், MRI பண்புகளும் திசுவியல் மற்றும் மொத்த உடற்கூறியல் அவதானிப்புகளை உறுதிப்படுத்துகின்றன, அதாவது, முதுகெலும்பு உடற்பகுதி செல்களில் ஏற்படும் மாற்றங்கள் படிப்படியாக நிகழ்கின்றன. கடுமையான காயத்தால் ஏற்படும் அழற்சி எதிர்வினை, துளையிட்ட உடனேயே தோன்றக்கூடும் என்றாலும், துளையிட்ட 12 வாரங்களுக்குப் பிறகு படிப்படியாக அதிகரிக்கும் சமிக்ஞை மாற்றங்கள் தோன்றி, எம்.ஆர்.ஐ மாற்றங்கள் மீள்வதற்கான அல்லது தலைகீழாக மாறுவதற்கான எந்த அறிகுறிகளும் இன்றி 20 வாரங்கள் வரை நீடித்தன என்பதை எம்.ஆர்.ஐ முடிவுகள் காட்டின. இந்த முடிவுகள், முயல்களில் படிப்படியான இயந்திர சுவாசத்தை (MV) ஏற்படுத்துவதற்கு, தன்னுடலிலிருந்து எடுக்கப்பட்ட முதுகெலும்பு நானோ துகள்கள் (autologous vertebral NP) ஒரு நம்பகமான முறையாகும் என்பதை உணர்த்துகின்றன.
இந்தத் துளையிடும் முறைக்கு போதுமான திறமை, நேரம் மற்றும் அறுவை சிகிச்சை முயற்சி தேவைப்படுகிறது. ஆரம்பகட்ட சோதனைகளில், முதுகெலும்புக்கு அருகிலுள்ள தசைநார் அமைப்புகளைப் பிரிப்பது அல்லது அதிகப்படியாகத் தூண்டுவது முதுகெலும்பு ஆஸ்டியோஃபைட்டுகள் உருவாக வழிவகுக்கும். அருகிலுள்ள வட்டுகளைச் சேதப்படுத்தவோ அல்லது எரிச்சலூட்டவோ கூடாது என்பதில் கவனமாக இருக்க வேண்டும். சீரான மற்றும் மீண்டும் மீண்டும் பெறக்கூடிய முடிவுகளைப் பெறுவதற்கு, துளையிடும் ஆழம் கட்டுப்படுத்தப்பட வேண்டியிருப்பதால், 3 மிமீ நீளமுள்ள ஊசியின் உறையை வெட்டி, நாங்கள் கையால் ஒரு அடைப்பானை உருவாக்கினோம். இந்த அடைப்பானைப் பயன்படுத்துவது, முதுகெலும்புப் பகுதியில் சீரான துளையிடும் ஆழத்தை உறுதி செய்கிறது. ஆரம்பகட்ட சோதனைகளில், இந்த அறுவை சிகிச்சையில் ஈடுபட்ட மூன்று எலும்பியல் அறுவை சிகிச்சை நிபுணர்கள், 18-கேஜ் ஊசிகள் அல்லது பிற முறைகளை விட 16-கேஜ் ஊசிகளைக் கையாள்வது எளிதாக இருப்பதைக் கண்டறிந்தனர். துளையிடும்போது அதிகப்படியான இரத்தப்போக்கைத் தவிர்க்க, ஊசியை சிறிது நேரம் அசைக்காமல் வைத்திருப்பது மிகவும் பொருத்தமான செருகும் துளையை வழங்கும், இது ஒரு குறிப்பிட்ட அளவு MC-ஐ இந்த வழியில் கட்டுப்படுத்த முடியும் என்பதைக் காட்டுகிறது.
பல ஆய்வுகள் MC-ஐ இலக்காகக் கொண்டிருந்தாலும், MC-யின் நோய்க்காரணம் மற்றும் நோய்ப் பிறப்பு பற்றி அதிகம் அறியப்படவில்லை²⁵,²⁶,²⁷. எங்களின் முந்தைய ஆய்வுகளின் அடிப்படையில், MC-யின் தோற்றம் மற்றும் வளர்ச்சியில் தன்னெதிர்ப்பு ஒரு முக்கியப் பங்கு வகிக்கிறது என்பதைக் கண்டறிந்தோம்¹². இந்த ஆய்வு, ஆன்டிஜென் தூண்டுதலுக்குப் பிறகு CD4+ செல்களின் முக்கிய வேறுபாட்டுப் பாதைகளான IL-4, IL-17 மற்றும் IFN-γ ஆகியவற்றின் அளவுசார் வெளிப்பாட்டை ஆய்வு செய்தது. எங்கள் ஆய்வில், எதிர்மறைக் குழுவுடன் ஒப்பிடும்போது, ​​NPE குழுவில் IL-4, IL-17 மற்றும் IFN-γ ஆகியவற்றின் வெளிப்பாடு அதிகமாக இருந்தது, மேலும் IL-4 மற்றும் IL-17 ஆகியவற்றின் புரத அளவுகளும் அதிகமாக இருந்தன.
மருத்துவ ரீதியாக, வட்டுப் பிதுக்கம் உள்ள நோயாளிகளின் NP செல்களில் IL-17 mRNA வெளிப்பாடு அதிகரித்துள்ளது²⁸. ஆரோக்கியமான கட்டுப்பாட்டுக் குழுவினருடன் ஒப்பிடும்போது, ​​கடுமையான அழுத்தமற்ற வட்டுப் பிதுக்க மாதிரியில் அதிகரித்த IL-4 மற்றும் IFN-γ வெளிப்பாடு அளவுகளும் கண்டறியப்பட்டன²⁹. IL-17, தன்னுடல் தாக்குநோய்களில் ஏற்படும் அழற்சி மற்றும் திசு சேதத்தில் முக்கியப் பங்கு வகிக்கிறது³⁰ மற்றும் IFN-γ-க்கான நோயெதிர்ப்புத் துலங்கலை மேம்படுத்துகிறது³¹. MRL/lpr எலிகள்³² மற்றும் தன்னுடல் தாக்குநோய்க்கு எளிதில் பாதிக்கப்படக்கூடிய எலிகள்³³ ஆகியவற்றில் மேம்படுத்தப்பட்ட IL-17-மத்தியஸ்த திசு சேதம் பதிவாகியுள்ளது. IL-4, அழற்சியைத் தூண்டும் சைட்டோகைன்களின் (IL-1β மற்றும் TNFα போன்றவை) வெளிப்பாட்டையும் மேக்ரோபேஜ் செயல்பாட்டையும் தடுக்க முடியும்³⁴. ஒரே நேரத்தில் IL-17 மற்றும் IFN-γ உடன் ஒப்பிடும்போது, ​​NPE குழுவில் IL-4-இன் mRNA வெளிப்பாடு வேறுபட்டதாகப் பதிவாகியுள்ளது; NPE குழுவில் IFN-γ-இன் mRNA வெளிப்பாடு மற்ற குழுக்களை விட குறிப்பிடத்தக்க அளவில் அதிகமாக இருந்தது. எனவே, NP இடைச்செருகலால் தூண்டப்படும் அழற்சி எதிர்வினைக்கு IFN-γ உற்பத்தி ஒரு மத்தியஸ்தராக இருக்கலாம். செயல்படுத்தப்பட்ட வகை 1 ஹெல்பர் T செல்கள், நேச்சுரல் கில்லர் செல்கள் மற்றும் மேக்ரோபேஜ்கள்35,36 உள்ளிட்ட பல செல் வகைகளால் IFN-γ உற்பத்தி செய்யப்படுகிறது என்றும், இது நோயெதிர்ப்பு எதிர்வினைகளை ஊக்குவிக்கும் ஒரு முக்கிய அழற்சி சார்பு சைட்டோகைன்37 என்றும் ஆய்வுகள் காட்டுகின்றன.
MC-யின் தோற்றம் மற்றும் வளர்ச்சியில் தன்னுடல் தாக்குநோய் எதிர்வினை சம்பந்தப்பட்டிருக்கலாம் என்று இந்த ஆய்வு தெரிவிக்கிறது. லூமா மற்றும் அவரது குழுவினர், MRI-யில் MC மற்றும் புடைத்த NP-யின் சமிக்ஞை பண்புகள் ஒரே மாதிரியாக இருப்பதாகவும், இரண்டும் T2W வரிசையில் உயர் சமிக்ஞையைக் காட்டுவதாகவும் கண்டறிந்தனர்³⁸. IL-1 போன்ற சில சைட்டோகைன்கள் MC-யின் தோற்றத்துடன் நெருங்கிய தொடர்புடையவை என உறுதி செய்யப்பட்டுள்ளன³⁹. மா மற்றும் அவரது குழுவினர், NP-யின் மேல்நோக்கிய அல்லது கீழ்நோக்கிய புடைப்பு MC-யின் தோற்றம் மற்றும் வளர்ச்சியில் பெரும் தாக்கத்தை ஏற்படுத்தக்கூடும் என்று பரிந்துரைத்தனர்¹². போபெச்கோ⁴⁰ மற்றும் ஹெர்ஸ்பெய்ன் மற்றும் அவரது குழுவினர்⁴¹, NP என்பது பிறப்பிலிருந்தே இரத்த நாள சுழற்சிக்குள் நுழைய முடியாத ஒரு நோயெதிர்ப்பு சகிப்புத்தன்மை கொண்ட திசு என்று தெரிவித்தனர். NP புடைப்புகள் இரத்த ஓட்டத்தில் அந்நியப் பொருட்களை அறிமுகப்படுத்துகின்றன, அதன் மூலம் உள்ளூர் தன்னுடல் தாக்குநோய் எதிர்வினைகளைத் தூண்டுகின்றன⁴². தன்னுடல் தாக்குநோய் எதிர்வினைகள் அதிக எண்ணிக்கையிலான நோயெதிர்ப்பு காரணிகளைத் தூண்டக்கூடும், மேலும் இந்தக் காரணிகள் திசுக்களுக்குத் தொடர்ந்து வெளிப்படும்போது, ​​அவை சமிக்ஞையில் மாற்றங்களை ஏற்படுத்தக்கூடும்⁴³. இந்த ஆய்வில், IL-4, IL-17 மற்றும் IFN-γ ஆகியவற்றின் மிகை வெளிப்பாடு பொதுவான நோயெதிர்ப்பு காரணிகளாகும், இது NP மற்றும் MC-களுக்கு இடையிலான நெருங்கிய உறவை மேலும் நிரூபிக்கிறது⁴⁴. இந்த விலங்கு மாதிரியானது, NP-யின் உடைப்பையும் இறுதித் தட்டிற்குள் அது நுழைவதையும் நன்கு ஒத்திருக்கிறது. இந்த செயல்முறை, MC-யின் மீது தன்னுடல் தாக்குநோயின் தாக்கத்தை மேலும் வெளிப்படுத்தியது.
எதிர்பார்த்தபடியே, இந்த விலங்கு மாதிரியானது MC-ஐப் பற்றி ஆய்வு செய்வதற்கு ஒரு சாத்தியமான தளத்தை நமக்கு வழங்குகிறது. இருப்பினும், இந்த மாதிரியில் இன்னும் சில வரம்புகள் உள்ளன: முதலாவதாக, விலங்குகளைக் கண்காணிக்கும் கட்டத்தில், திசுவியல் மற்றும் மூலக்கூறு உயிரியல் சோதனைகளுக்காக சில இடைநிலை முயல்களை கருணைக்கொலை செய்ய வேண்டியுள்ளது, எனவே காலப்போக்கில் சில விலங்குகள் "பயன்பாட்டிலிருந்து விலகிவிடுகின்றன". இரண்டாவதாக, இந்த ஆய்வில் மூன்று காலப் புள்ளிகள் நிர்ணயிக்கப்பட்டிருந்தாலும், துரதிர்ஷ்டவசமாக, நாம் ஒரு வகை MC-ஐ (மோடிக் வகை I மாற்றம்) மட்டுமே மாதிரியாகக் கொண்டுள்ளோம், எனவே இது மனித நோய் வளர்ச்சி செயல்முறையைப் பிரதிநிதித்துவப்படுத்த போதுமானதாக இல்லை, மேலும் அனைத்து சமிக்ஞை மாற்றங்களையும் சிறப்பாகக் கவனிக்க இன்னும் பல காலப் புள்ளிகள் அமைக்கப்பட வேண்டும். மூன்றாவதாக, திசு அமைப்பில் ஏற்படும் மாற்றங்களை திசுவியல் சாயமேற்றல் மூலம் தெளிவாகக் காட்ட முடியும், ஆனால் சில சிறப்பு நுட்பங்கள் இந்த மாதிரியில் உள்ள நுண் கட்டமைப்பு மாற்றங்களை இன்னும் சிறப்பாக வெளிப்படுத்த முடியும். உதாரணமாக, முயல்களின் முதுகெலும்பிடைத் தட்டுகளில் நாரிழைக் குருத்தெலும்பு உருவாவதை ஆய்வு செய்ய முனைவாக்கப்பட்ட ஒளி நுண்ணோக்கி பயன்படுத்தப்பட்டது45. MC மற்றும் இறுதித் தட்டின் மீது NP-இன் நீண்டகால விளைவுகளுக்கு மேலும் ஆய்வு தேவைப்படுகிறது.
ஐம்பத்து நான்கு ஆண் நியூசிலாந்து வெள்ளை முயல்கள் (எடை சுமார் 2.5-3 கிலோ, வயது 3-3.5 மாதங்கள்) சீரற்ற முறையில் போலி அறுவை சிகிச்சைக் குழு, தசை உள்வைப்புக் குழு (ME குழு) மற்றும் நரம்பு வேர் உள்வைப்புக் குழு (NPE குழு) எனப் பிரிக்கப்பட்டன. அனைத்து சோதனை நடைமுறைகளும் தியான்ஜின் மருத்துவமனையின் நெறிமுறைக் குழுவால் அங்கீகரிக்கப்பட்டன, மேலும் சோதனை முறைகள் அங்கீகரிக்கப்பட்ட வழிகாட்டுதல்களுக்கு இணங்கக் கடுமையாக மேற்கொள்ளப்பட்டன.
எஸ். சோபாஜிமாவின் அறுவை சிகிச்சை நுட்பத்தில் சில மேம்பாடுகள் செய்யப்பட்டுள்ளன 46. ஒவ்வொரு முயலும் பக்கவாட்டு நிலையில் படுக்க வைக்கப்பட்டு, பின்புற-பக்கவாட்டு ரெட்ரோபெரிட்டோனியல் அணுகுமுறையைப் பயன்படுத்தி, அடுத்தடுத்த ஐந்து இடுப்பு முதுகெலும்பிடைத் தட்டுகளின் (IVDs) முன்புற மேற்பரப்பு வெளிப்படுத்தப்பட்டது. ஒவ்வொரு முயலுக்கும் பொது மயக்க மருந்து (20% யூரிதேன், காது நரம்பு வழியாக 5 மி.லி/கி.கி) கொடுக்கப்பட்டது. விலா எலும்புகளின் கீழ் விளிம்பிலிருந்து இடுப்பு விளிம்பு வரை, பாராவெர்டெப்ரல் தசைகளுக்கு 2 செ.மீ முன்புறமாக, ஒரு நீளமான தோல் கீறல் செய்யப்பட்டது. L1 முதல் L6 வரையிலான வலது முன்புற-பக்கவாட்டு முதுகெலும்பு, அதன் மேலுள்ள தோலடி திசு, ரெட்ரோபெரிட்டோனியல் திசு மற்றும் தசைகளை கூர்மையான மற்றும் மழுங்கிய முறையில் பிரித்தெடுப்பதன் மூலம் வெளிப்படுத்தப்பட்டது (படம் 6A). L5-L6 தட்டு மட்டத்திற்கான உடற்கூறியல் அடையாளமாக இடுப்பு விளிம்பைப் பயன்படுத்தி தட்டு மட்டம் தீர்மானிக்கப்பட்டது. L5 முதுகெலும்பின் இறுதித் தட்டுக்கு அருகில் 3 மி.மீ ஆழத்திற்கு ஒரு துளையிட 16-கேஜ் துளை ஊசியைப் பயன்படுத்தவும் (படம் 6B). L1-L2 முதுகெலும்பிடை வட்டில் உள்ள தன்னுடலிலுள்ள நியூக்ளியஸ் பல்போசஸை உறிஞ்சுவதற்கு 5-மிலி சிரிஞ்சைப் பயன்படுத்தவும் (படம் 6C). ஒவ்வொரு குழுவின் தேவைகளுக்கு ஏற்ப நியூக்ளியஸ் பல்போசஸ் அல்லது தசையை அகற்றவும். துளையிடப்பட்ட இடம் ஆழப்படுத்தப்பட்ட பிறகு, அறுவை சிகிச்சையின் போது முதுகெலும்பு உடலின் புறத்தோல் திசுக்களுக்கு சேதம் ஏற்படாதவாறு கவனமாக, ஆழமான சவ்வு, மேலோட்டமான சவ்வு மற்றும் தோலில் உறிஞ்சக்கூடிய தையல்கள் இடப்படுகின்றன.
(A) பின்புற-பக்கவாட்டு ரெட்ரோபெரிட்டோனியல் அணுகுமுறை வழியாக L5–L6 வட்டு வெளிப்படுத்தப்படுகிறது. (B) L5 எண்ட்பிளேட்டிற்கு அருகில் துளையிட 16-கேஜ் ஊசியைப் பயன்படுத்தவும். (C) தன்னுடலிலிருந்து எடுக்கப்பட்ட MF-கள் அறுவடை செய்யப்படுகின்றன.
காது சிரை வழியாக 20% யூரிதேன் (5 மி.லி/கிலோ) செலுத்தி பொது மயக்க மருந்து கொடுக்கப்பட்டது, மேலும் அறுவை சிகிச்சைக்குப் பின் 12, 16 மற்றும் 20 வாரங்களில் இடுப்பு முதுகெலும்பு எக்ஸ்-கதிர்ப் படங்கள் மீண்டும் எடுக்கப்பட்டன.
அறுவை சிகிச்சைக்குப் பிறகு 12, 16 மற்றும் 20 வாரங்களில், கெட்டமைன் (25.0 மி.கி/கி.கி) தசைவழி ஊசி மூலமாகவும், சோடியம் பென்டோபார்பிட்டால் (1.2 கி/கி.கி) நரம்புவழி ஊசி மூலமாகவும் முயல்கள் பலியிடப்பட்டன. திசுவியல் பகுப்பாய்விற்காக முழு முதுகெலும்பும் அகற்றப்பட்டு, மெய் பகுப்பாய்வு மேற்கொள்ளப்பட்டது. நோயெதிர்ப்பு காரணிகளில் ஏற்படும் மாற்றங்களைக் கண்டறிய அளவுசார் தலைகீழ் படியெடுத்தல் (RT-qPCR) மற்றும் வெஸ்டர்ன் பிளாட்டிங் பயன்படுத்தப்பட்டன.
ஆர்த்தோகனல் லிம்ப் காயில் ரிசீவர் பொருத்தப்பட்ட 3.0 T மருத்துவ காந்தத்தைப் (GE மெடிக்கல் சிஸ்டம்ஸ், புளோரன்ஸ், SC) பயன்படுத்தி முயல்களில் MRI பரிசோதனைகள் செய்யப்பட்டன. முயல்களுக்குக் காது நரம்பு வழியாக 20% யூரிதேன் (5 மி.லி/கி.கி) செலுத்தி மயக்கமளிக்கப்பட்டது. பின்னர் அவை காந்தத்திற்குள் மல்லாக்கப் படுக்க வைக்கப்பட்டன; அவற்றின் இடுப்புப் பகுதி, 5-அங்குல விட்டம் கொண்ட வட்ட வடிவ மேற்பரப்புச் சுருளின் (GE மெடிக்கல் சிஸ்டம்ஸ்) மையத்தில் அமைந்திருந்தது. L3–L4 முதல் L5–L6 வரையிலான இடுப்பு வட்டின் இருப்பிடத்தை வரையறுக்க, கொரோனல் T2-வெயிட்டட் லோக்கலைசர் படங்கள் (TR, 1445 மி.செ; TE, 37 மி.செ) பெறப்பட்டன. சஜிடல் பிளேன் T2-வெயிட்டட் ஸ்லைஸ்கள் பின்வரும் அமைப்புகளுடன் பெறப்பட்டன: 2200 மி.செ ரிப்பீடிஷன் டைம் (TR) மற்றும் 70 மி.செ எக்கோ டைம் (TE) கொண்ட ஃபாஸ்ட் ஸ்பின்-எக்கோ சீக்வென்ஸ், மேட்ரிக்ஸ்; 260 பார்வைப் புலம் மற்றும் எட்டு தூண்டல்கள்; வெட்டும் தடிமன் 2 மி.மீ, இடைவெளி 0.2 மி.மீ.
கடைசிப் புகைப்படம் எடுக்கப்பட்டு, கடைசி முயல் கொல்லப்பட்ட பிறகு, திசுவியல் பரிசோதனைக்காக ஷாம், தசையில் பதிக்கப்பட்ட மற்றும் NP வட்டுகள் அகற்றப்பட்டன. திசுக்கள் 10% நடுநிலை தாங்கல் செய்யப்பட்ட ஃபார்மாலினில் 1 வாரம் நிலைப்படுத்தப்பட்டு, எத்திலீன்டையமீன்டெட்ராஅசிட்டிக் அமிலத்தால் கால்சியம் நீக்கப்பட்டு, பாரஃபின் துண்டுகளாக வெட்டப்பட்டன. திசுத் தொகுதிகள் பாரஃபினில் பதிக்கப்பட்டு, ஒரு மைக்ரோடோமைப் பயன்படுத்தி சஜிடல் பிரிவுகளாக (5 μm தடிமன்) வெட்டப்பட்டன. பிரிவுகள் ஹீமடாக்சிலின் மற்றும் ஈயோசின் (H&E) கொண்டு சாயமிடப்பட்டன.
ஒவ்வொரு குழுவிலிருந்தும் முயல்களின் முதுகெலும்பிடைத் தட்டுகளைச் சேகரித்த பிறகு, உற்பத்தியாளரின் அறிவுறுத்தல்களின்படி UNIQ-10 காலம் (ஷாங்காய் சாங்கோன் பயோடெக்னாலஜி கோ., லிமிடெட், சீனா) மற்றும் ImProm II ரிவர்ஸ் டிரான்ஸ்கிரிப்ஷன் சிஸ்டம் (புரோமேகா இன்க்., மாடிசன், WI, USA) ஆகியவற்றைப் பயன்படுத்தி மொத்த ஆர்.என்.ஏ பிரித்தெடுக்கப்பட்டது. ரிவர்ஸ் டிரான்ஸ்கிரிப்ஷன் செய்யப்பட்டது.
உற்பத்தியாளரின் அறிவுறுத்தல்களின்படி, பிரிசம் 7300 (அப்ளைடு பயோசிஸ்டம்ஸ் இன்க்., அமெரிக்கா) மற்றும் SYBR கிரீன் ஜம்ப் ஸ்டார்ட் டாக் ரெடிமிக்ஸ் (சிக்மா-ஆல்ட்ரிச், செயின்ட் லூயிஸ், MO, அமெரிக்கா) ஆகியவற்றைப் பயன்படுத்தி RT-qPCR செய்யப்பட்டது. PCR வினை அளவு 20 μl ஆக இருந்தது, அதில் 1.5 μl நீர்த்த cDNA மற்றும் ஒவ்வொரு பிரைமரும் 0.2 μM அளவில் இருந்தன. பிரைமர்கள் ஓலிகோபெர்ஃபெக்ட் டிசைனர் (இன்விட்ரோஜென், வலென்சியா, CA) மூலம் வடிவமைக்கப்பட்டு, நான்ஜிங் கோல்டன் ஸ்டீவர்ட் பயோடெக்னாலஜி கோ., லிமிடெட் (சீனா) மூலம் தயாரிக்கப்பட்டன (அட்டவணை 1). பின்வரும் வெப்ப சுழற்சி நிலைமைகள் பயன்படுத்தப்பட்டன: ஆரம்ப பாலிமரேஸ் செயல்படுத்தும் படி 94°C-ல் 2 நிமிடங்களுக்கு, பின்னர் டெம்ப்ளேட் சிதைவுக்காக 94°C-ல் தலா 15 வினாடிகள் கொண்ட 40 சுழற்சிகள், 60°C-ல் 1 நிமிடத்திற்கு அனீலிங், நீட்டிப்பு மற்றும் ஒளிர்தல் அளவீடுகள் 72°C-ல் 1 நிமிடத்திற்கு செய்யப்பட்டன. அனைத்து மாதிரிகளும் மூன்று முறை பெருக்கப்பட்டு, அதன் சராசரி மதிப்பு RT-qPCR பகுப்பாய்விற்குப் பயன்படுத்தப்பட்டது. பெருக்கத் தரவுகள் FlexStation 3 (Molecular Devices, Sunnyvale, CA, USA) மென்பொருளைப் பயன்படுத்தி பகுப்பாய்வு செய்யப்பட்டன. IL-4, IL-17, மற்றும் IFN-γ மரபணு வெளிப்பாடுகள் அகக் கட்டுப்பாட்டுடன் (ACTB) இயல்பாக்கப்பட்டன. இலக்கு mRNA-வின் சார்பு வெளிப்பாடு நிலைகள் 2-ΔΔCT முறையைப் பயன்படுத்தி கணக்கிடப்பட்டன.
புரோட்டியேஸ் மற்றும் பாஸ்படேஸ் தடுப்பான் கலவையைக் கொண்ட RIPA லைசிஸ் பஃபரில், ஒரு திசு ஹோமோஜெனைசரைப் பயன்படுத்தி திசுக்களிலிருந்து மொத்தப் புரதம் பிரித்தெடுக்கப்பட்டது. பின்னர், திசு சிதைவுகளை அகற்ற, அது 4°C வெப்பநிலையில் 20 நிமிடங்களுக்கு 13,000 rpm வேகத்தில் மையவிலக்கு செய்யப்பட்டது. ஒவ்வொரு லேனிலும் ஐம்பது மைக்ரோகிராம் புரதம் ஏற்றப்பட்டு, 10% SDS-PAGE மூலம் பிரிக்கப்பட்டு, பின்னர் ஒரு PVDF மென்படலத்திற்கு மாற்றப்பட்டது. அறை வெப்பநிலையில் 1 மணி நேரத்திற்கு, 0.1% ட்வீன் 20 கொண்ட ட்ரிஸ்-பஃபர்டு சலைன் (TBS) கரைசலில் உள்ள 5% கொழுப்பில்லாத உலர் பாலில் பிளாக்கிங் செய்யப்பட்டது. அந்த மென்படலம், முயல் ஆன்டி-டெகோரின் முதன்மை ஆன்டிபாடியுடன் (1:200 என்ற விகிதத்தில் நீர்க்கப்பட்டது; போஸ்டர், வுஹான், சீனா) (1:200 என்ற விகிதத்தில் நீர்க்கப்பட்டது; பயோஸ், பெய்ஜிங், சீனா) 4°C வெப்பநிலையில் இரவு முழுவதும் இன்குபேட் செய்யப்பட்டு, இரண்டாம் நாளில் வினைபுரியச் செய்யப்பட்டது. இரண்டாம் நிலை ஆன்டிபாடியுடன் (1:40,000 நீர்த்தலில் வெள்ளாட்டுக்கு எதிரான முயல் இம்யூனோகுளோபுலின் G) ஹார்ஸ்ராடிஷ் பெராக்ஸைடு (போஸ்டர், வுஹான், சீனா) சேர்த்து, அறை வெப்பநிலையில் 1 மணி நேரம் வைக்கப்பட்டது. எக்ஸ்-கதிர் வீச்சுக்குப் பிறகு, வேதி ஒளிரும் சவ்வில் அதிகரித்த வேதி ஒளிர்தல் மூலம் வெஸ்டர்ன் பிளாட் சமிக்ஞைகள் கண்டறியப்பட்டன. அடர்த்திமானி பகுப்பாய்விற்காக, பிளாட்கள் பேண்ட்ஸ்கேன் மென்பொருளைப் பயன்படுத்தி ஸ்கேன் செய்யப்பட்டு அளவிடப்பட்டன, மேலும் முடிவுகள் இலக்கு மரபணுவின் இம்யூனோரியாக்டிவிட்டிக்கும் டியூபுலின் இம்யூனோரியாக்டிவிட்டிக்கும் இடையிலான விகிதமாக வெளிப்படுத்தப்பட்டன.
புள்ளிவிவரக் கணக்கீடுகள் SPSS16.0 மென்பொருள் தொகுப்பைப் (SPSS, USA) பயன்படுத்தி மேற்கொள்ளப்பட்டன. ஆய்வின் போது சேகரிக்கப்பட்ட தரவுகள் சராசரி ± திட்ட விலக்கம் (mean ± SD) என வெளிப்படுத்தப்பட்டு, இரு குழுக்களுக்கும் இடையிலான வேறுபாடுகளைக் கண்டறிய ஒருவழி மீள் அளவீட்டு மாறுபாட்டுப் பகுப்பாய்வு (ANOVA) மூலம் பகுப்பாய்வு செய்யப்பட்டன. P < 0.05 என்பது புள்ளிவிவர ரீதியாக குறிப்பிடத்தக்கதாகக் கருதப்பட்டது.
எனவே, தன்னுடலிலிருந்து எடுக்கப்பட்ட நானோ துகள்களை முதுகெலும்புத் தொகுதியில் பொருத்தி, பேரமைப்பு உடற்கூறியல் கண்காணிப்பு, MRI பகுப்பாய்வு, திசுவியல் மதிப்பீடு மற்றும் மூலக்கூறு உயிரியல் பகுப்பாய்வு ஆகியவற்றை மேற்கொள்வதன் மூலம் MC-க்கான ஒரு விலங்கு மாதிரியை நிறுவுவது, மனித MC-யின் இயக்கமுறைகளை மதிப்பிடுவதற்கும் புரிந்துகொள்வதற்கும் மற்றும் புதிய சிகிச்சை முறைகளை உருவாக்குவதற்கும் ஒரு முக்கியமான கருவியாக அமையக்கூடும்.
இந்தக் கட்டுரையை மேற்கோள் காட்டுவது எப்படி: ஹான், சி. மற்றும் பலர். இடுப்பு முதுகெலும்பின் குருத்தெலும்புக்குக் கீழுள்ள எலும்பில் தன்னுடலிலிருந்து எடுக்கப்பட்ட நியூக்ளியஸ் பல்போசஸைப் பொருத்துவதன் மூலம் மோடிக் மாற்றங்களுக்கான ஒரு விலங்கு மாதிரி நிறுவப்பட்டது. அறிவியல் அறிக்கைகள் 6, 35102: 10.1038/srep35102 (2016).
வெய்ஷாப்ட், டி., சானெட்டி, எம்., ஹோட்லர், ஜே., மற்றும் பூஸ், என். இடுப்பு முதுகெலும்பின் காந்த அதிர்வுப் படமெடுத்தல்: அறிகுறியற்ற தன்னார்வலர்களிடையே வட்டுப் பிதுக்கம் மற்றும் தக்கவைப்பு, நரம்பு வேர் அழுத்தம், இறுதித் தட்டு அசாதாரணங்கள், மற்றும் முகப்பு மூட்டு கீல்வாதம் ஆகியவற்றின் பரவல். ரேடியாலஜி 209, 661–666, doi:10.1148/radiology.209.3.9844656 (1998).
கியர், பி., கோர்ஷோல்ம், எல்., பெண்டிக்ஸ், டி., சோரன்சென், ஜே.எஸ்., மற்றும் லெபோஃப்-ஈட், கே. மோடிக் மாற்றங்களும் மருத்துவக் கண்டுபிடிப்புகளுடனான அவற்றின் தொடர்பும். ஐரோப்பிய முதுகெலும்பு இதழ்: ஐரோப்பிய முதுகெலும்பு சங்கம், ஐரோப்பிய முதுகெலும்பு சிதைவு சங்கம், மற்றும் ஐரோப்பிய கழுத்து முதுகெலும்பு ஆராய்ச்சி சங்கம் ஆகியவற்றின் அதிகாரப்பூர்வ வெளியீடு 15, 1312–1319, doi: 10.1007/s00586-006-0185-x (2006).
குயிஸ்மா, எம்., மற்றும் பலர். இடுப்பு முதுகெலும்பு முனைகளில் ஏற்படும் மோடிக் மாற்றங்கள்: நடுத்தர வயது ஆண் தொழிலாளர்களிடையே கீழ் முதுகு வலி மற்றும் சியாட்டிகாவுடனான பரவல் மற்றும் தொடர்பு. ஸ்பைன் 32, 1116–1122, doi:10.1097/01.brs.0000261561.12944.ff (2007).
டி ரூஸ், ஏ., க்ரெஸ்ஸல், எச்., ஸ்பிரிட்ஸர், கே., மற்றும் டலிங்கா, எம். இடுப்பு முதுகெலும்பின் சிதைவு நோயில் இறுதித் தட்டுக்கு அருகிலுள்ள எலும்பு மஜ்ஜை மாற்றங்களின் எம்.ஆர்.ஐ. ஏ.ஜே.ஆர். அமெரிக்கன் ஜர்னல் ஆஃப் ரேடியாலஜி 149, 531–534, டோய்: 10.2214/ajr.149.3.531 (1987).
மோடிக், எம்.டி., ஸ்டீன்பெர்க், பி.எம்., ராஸ், ஜே.எஸ்., மசாரிக், டி.ஜே., மற்றும் கார்ட்டர், ஜே.ஆர். சிதைவுற்ற வட்டு நோய்: எம்.ஆர்.ஐ. மூலம் முதுகெலும்பு மஜ்ஜை மாற்றங்களின் மதிப்பீடு. ரேடியாலஜி 166, 193–199, doi:10.1148/radiology.166.1.3336678 (1988).
மோடிக், எம்.டி., மசாரிக், டி.ஜே., ராஸ், ஜே.எஸ்., மற்றும் கார்ட்டர், ஜே.ஆர். சிதைவுற்ற வட்டு நோயின் பிம்பவியல். ரேடியாலஜி 168, 177–186, doi: 10.1148/radiology.168.1.3289089 (1988).
ஜென்சன், டி.எஸ்., மற்றும் பலர். பொது மக்களிடையே நியோவெர்டெப்ரல் எண்ட்பிளேட் (மோடிக்) சிக்னல் மாற்றங்களின் முன்கணிப்பாளர்கள். ஐரோப்பிய ஸ்பைன் ஜர்னல்: ஐரோப்பிய ஸ்பைன் சொசைட்டி, ஐரோப்பிய சொசைட்டி ஆஃப் ஸ்பைனல் டிஃபார்மிட்டி, மற்றும் ஐரோப்பிய சொசைட்டி ஃபார் செர்விகல் ஸ்பைன் ரிசர்ச் ஆகியவற்றின் அதிகாரப்பூர்வ வெளியீடு, பிரிவு 19, 129–135, doi: 10.1007/s00586-009-1184-5 (2010).
ஆல்பர்ட், எச்.பி மற்றும் மான்னிஷ், கே. இடுப்புத் தட்டுப் பிதுக்கத்திற்குப் பிறகான மோடிக் மாற்றங்கள். ஐரோப்பிய முதுகெலும்பு இதழ் : ஐரோப்பிய முதுகெலும்பு சங்கம், ஐரோப்பிய முதுகெலும்பு உருக்குலைவு சங்கம் மற்றும் ஐரோப்பிய கழுத்து முதுகெலும்பு ஆராய்ச்சி சங்கத்தின் அதிகாரப்பூர்வ வெளியீடு 16, 977–982, doi: 10.1007/s00586-007-0336-8 (2007).
கெர்ட்டுலா, எல்., லுயோமா, கே., வெஹ்மாஸ், டி., க்ரோன்பிளாட், எம்., மற்றும் காப்பா, இ. மோடிக் வகை I மாற்றங்கள் வேகமாக முன்னேறும் உருக்குலைவு வட்டுச் சிதைவை முன்கணிக்க முடியும்: ஒரு வருட வருங்கால ஆய்வு. ஐரோப்பிய முதுகெலும்பு இதழ் 21, 1135–1142, doi: 10.1007/s00586-012-2147-9 (2012).
ஹு, இசட்.ஜே., ஜாவோ, எஃப்.டி., ஃபாங், எக்ஸ்.கியூ. மற்றும் ஃபேன், எஸ்.டபிள்யூ. மோடிக் மாற்றங்கள்: இடுப்புத் தட்டுச் சிதைவுக்கான சாத்தியமான காரணங்களும் பங்களிப்பும். மருத்துவக் கருதுகோள்கள் 73, 930–932, doi: 10.1016/j.mehy.2009.06.038 (2009).
க்ரோக், எச்.வி. உள் வட்டு சிதைவு. 50 ஆண்டுகளுக்கும் மேலான வட்டு நழுவல் பிரச்சனைகள். ஸ்பைன் (ஃபிலா பா 1976) 11, 650–653 (1986).